Nota Applicativa Buona Prassi di Laboratorio N.12 – Validazione autoclave di laboratorio

Procedura Operativa Standard

- OGGETTO

Validazione Biologica dell’autoclave

- OBIETTIVO/SCOPO

Accertamento del corretto andamento del ciclo di sterilizzazione a vapore

- TERMINOLOGIA

Bioburden, SAL, D, z, °C, sterilizzazione, vapore saturo, Bacillus stearo­thermophylus

- DOCUMENTAZIONE DI RIFERIMENTO

Manuale di Istruzione Autoclave

Istruzioni indicatori biologici

- RESPONSABILITA’

Direttore Laboratorio di Microbiologia

- SICUREZZA

Tutte le manipolazioni devono essere eseguite indossando i DPI (camice, guanti, occhiali,etc.)

- MATERIALE

Indicatore biologico “Prospore II”

Incubatore

Sacchetti neutralizzazione indicatori biologici

- PROTOCOLLO

1. Introdurre nella camera di sterilizzazione in posizioni differenti, con il materiale da sterilizzare, almeno due (tre se si sterilizzano rifiuti sanitari) fiale di “Prospore II” identificate, aventi lo stesso numero di lotto (localizzare i punti più critici, ad es. vicino alla scarico).

2. Una terza (o quarta) fiala, avente lo stesso numero di lotto, non viene sottoposta a trattamento di ste­rilizzazione per costituire il “ controllo positivo” al fine di accertare la vitalità delle spore e le corrette prestazioni del terreno nutritivo.

3. Ultimato il ciclo di sterilizzazione programmato (attendere almeno 10 minuti per il raffreddamento): – chiudere il tappo della fiala premendo fortemente verso il basso – rompere le fiale in vetro contenenti il terreno delle provette sottoposte a ciclo di sterilizzazione e di quella non trattata premendo con una pinzetta.

4. Incubare a seconda del tipo di “Prospore II” per i tempi e temperature indicate.

-NON CONFORMITA’ -

NON CONFORMITA’	PROBABILE MOTIVO	AZIONE CORRETTIVA
Le fiale di “Prospore II”introdotte in autoclave hanno virato di colore	I microrganismi non sono stati inattivati dallasterilizzazione	-Accertare che non ci siano sacche di aria all’interno dell’autoclave-Accertare che sia stata impostata la cor­retta temperatura di sterilizzazione -Accertare che la termosonda dell’autoclave funzioni correttamente
La fiala testimone di“Prospore II” non ha virato di colore	I microrganismi nonsono vitali	Sostituire l’indicatore biologico, dopo aver accertato che sia stato incubato alla corretta temperatura

ARCHIVIAZIONE

I risultati vanno riportati nell’apposito registro di validazione dell’autoclave con firma dell’opearatore com­pleti di modello e numero di matricola dell’autoclave, data, tempo e temperatura (in °C) del ciclo di steriliz­zazione, lotto dell’indicatore e temperatura d’incubazione